Esteban Balla, es Especialista en Reproducción Bovina y fue el encargado del Laboratorio de Producción in vivo de Embriones que se realizó en la Cabaña El 35 de la familia Mantegna del Partido de Gral. Arenales (BA).
Balla pertenece al Staff de trabajo del IRAC (Instituto de Reproducción Animal Córdoba), con él charlamos y nos introdujo en el microscópico y fantástico mundo de los embriones.

¿Cómo nos podés explicar tu tarea?
Puntualmente mi tarea es, una vez que ellos (se refiere al equipo de Rodolfo Bertolaccioni y al Vet. Diego Mariani de Vedia), colectaron o sacaron todos los embriones del útero de las vacas y me entregan el filtro, yo lo lavo y vuelco todo el líquido del proceso del lavado en una Placa de Búsqueda. Una vez allí, yo trato de encontrar los embriones con la lupa estereoscópica (Microscopio de Laboratorio).

Luego, a medida que los voy encontrando, los retiro y los pongo en una placa más chica con un líquido de mantenimiento, que es un líquido lo más parecido al que se encuentra dentro del útero del animal. Una vez que están encontrados se lavan y con la lupa se clasifican según el estadio y la calidad.

¿Cómo se establece esta calidad?
Están dadas según normas internacionales y de acuerdo a lo indicado por la Sociedad Internacional de Transferencia de Embriones. Esto es de acuerdo a la cantidad de células que están muertas y cuantas están en crecimiento van a dar lo que sería la calidad del embrión. Luego según la calidad se decide si se trasfiere fresco o si se congela.

¿Esto lo decidís vos?
Se decide en conjunto con el equipo. Los embriones se clasifican en cuatro distintas calidades, uno, dos, tres y cuatro. Los que se trasfieren son Grado 1, 2 o 3 y se llaman Trasferibles, de estos los Grados 1 y 2 se pueden congelar y solo se pueden exportar los Grados 1. Los Grados 3 solamente se pueden transferir y debe ser inmediatamente luego de extraídos. Los Grados 4 de descartan, ya que son embriones muertos.

En este caso (se refiere al trabajo que estaban realizando), como vamos a congelar y a transferir, vamos a utilizar embriones Grados 2 y 3 y vamos a guardar para exportar los Grados 1.

¿Cómo es el proceso para guardarlos?
Una vez identificados y clasificados los coloco dentro de las pajuelas (pequeños tubos de vidrio) y los pongo en una congeladora que me va controlando el descenso de la temperatura en forma progresiva.

Los embriones necesitan de un progresivo descenso de la temperatura, donde se comienza desde -6 grados, que es lo que te permite la computadora, para continuar el descenso de 0,5 grados por minuto hasta -35 grados. Una vez que llegaron a este grado de enfriamiento se pueden poner dentro del Nitrógeno líquido para quedar a 196° Grados bajo cero.
Es importante destacar que los embriones, antes de este proceso de enfriamiento, se deben pasar por un líquido que se denomina Crioprotector, (Etilenglicol, el mismo anticongelante de motores pero mas refinado y en concentración diferente), que básicamente permite reemplazar el líquido que se encuentra dentro del embrión para que cuando se congele no se formen cristales en su interior y no se rompan las células. El Laboratorio es una construcción que esta estratégicamente ubicada al lado de la manga donde se están realizando las extracciones. No es un ambiente esterilizado pero sí muy limpio, cómodo y tranquilo. Es un proceso más de la tarea de extracción de embriones.

Otro especialista que se dio cita en la Cabaña El 35 fue el Medico Veterinario Rodolfo Bertolaccini (foto), de Marcos Juárez, Córdoba. Tenía a cargo la responsabilidad de la extracción embrionaria.

¿Cada cuanto se pueden sacar embriones?
Lo máximo es cada 28 a 30 días, luego de un tratamiento de 16 o 17 días donde a la vaca se la súper estimula, después se la insemina y se le sacan todos los embriones.

De esta manera no se depende de la detección de celos, siempre y cuando el objetivo de la Cabaña sea ese. El tema es qué haces con los embriones, si tenes el mercado bien, ya que se pueden exportar, pero de lo contrario estás supeditado a tu propio rodeo con lo cual con realizar esta tarea 2 o 3 veces por año es suficiente.

¿Que porcentaje de embriones se pueden extraen?
Se estima que recuperar entre el 75 y el 80% de los embriones o estructuras que ha producido el animal, es un buen trabajo.
¿Y cómo te das cuenta de la cantidad que ha producido?.
Nos damos cuenta por la palpación y por la experiencia que tenga el operario, también hay que tener en cuenta que depende mucho de la vaca, ya que anatómicamente nos debe permitir extraerlos.

¿Cual es el promedio de embriones que se pueden extraer?
Se estima que se pueden extraer entre 10 y 12 estructuras totales y de estas podés sacar entre 8 y 10 embriones, de los cuales pueden ser 2 o 3 Grados 1 y 2 o 3 Grados 2 por animal, el resto son Grados 3 y 4.

¿Como es la técnica de extracción?
Con la mano enguantada y lubricada entramos por el Recto palpando hasta encontrar los ovarios y las estructuras, Folículos y Cuerpos Lúteos.
Una vez que están localizadas, por ejemplo: palpamos en el ovario derecho 8 estructuras y en el izquierdo 5, se anotan y luego se correlaciona esta palpación con lo que se colecta en cada cuerno. Estas 13 estructuras nos pueden dar 9 o 10 embriones, entonces estamos en un promedio que nos indica una buena colecta.

¿Hasta aquí la palpación y luego?
Bueno…luego que hemos hecho la palpación le hacemos una anestesia epidural para que no nos haga fuerza y podamos trabajar tranquilos tanto en el Recto como en Útero. Introducimos la mano con la Sonda, atravesamos el útero en búsqueda del cuerno lo mas adelante posible, esto depende de cada vaca, se infla el baloncito de la sonda para fijarla, se retira el mandril y comenzamos con el lavado con el líquido con jeringas de 20 centímetros recuperando el todo líquido extraído en un filtro especial de malla muy fina para que queden allí atrapados los embriones. Así hasta lograr hacer 8 lavados continuos. Luego Esteban Balla recupera los embriones de estos filtros.

¿Y cómo se hace con las receptoras?
Es lo mismo, primero hay que clasificar las receptoras para saber donde están los ovarios, donde están los cuerpos lúteos y de qué tipo son, Grado 1, 2 o 3.

Así seleccionamos a las receptoras que vamos a usar, descartamos a las que no sirven y con otro Pistolete cargamos las pajuelas con los embriones y los depositamos en la misma altura de donde los sacamos.

¿Por qué se deben colocar a la misma altura?
Nosotros con la palpación lo que hacemos es identificar el ovario que nos esta dando Progesterona, el Cuerpo Lúteo. Por ejemplo si el ovario derecho tiene la estructura del Cuerpo Lúteo entonces debemos inseminar o transferir en ese cuerpo.

¿Qué porcentaje de eficacia tiene este método?
Anda entre el 40 al 60%. Las variables de un fracaso son varias, desde la calidad de los Cuerpos Lúteos de la receptora hasta la calidad de los embriones que transferís y la correlación de ambos estadíos.

Finalmente y antes de despedirnos de la Cabaña El 35, charlamos con el Médico Veterinario Diego Mariani, titular de la Consultora Desarrollo Ganadero de la ciudad de Vedia. Con él hablamos de Manejo Reproductivo y cómo proyectar una inversión ganadera. Pero esta queda para la próxima NotiCampo.

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